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摘要:近年來,隨著我國學技術水平的提高,化學發光免疫分析法由于其自身靈敏度高、穩定可靠等優點,在醫學臨床應用中受到了廣泛認可。本文結合化學發光免疫分析方法的臨床應用,重點分析了其分類、特點以及應用范圍。
化學發光免疫分析法的廣泛應用于臨床醫學、食品、環境等領域,在實際應用中,可為樣品分析提高技術支持,在臨床醫學診療中有著舉足輕重的地位。
主流的化學發光免疫分析方法共三類,各自的標記物及增強劑均不同
化學發光免疫分析方法在發光原理和發光所用的標記物方面有所不同,主流的方法有電化學發光免疫分析、直接化學發光免疫分析和酶促化學發光免疫分析法。其中,電化學發光免疫分析是根據電極表面的電化學發光劑發生電化學反應產生光信號,常用的發光體系有吖啶酯類、過氧化草酸酯類等,該方法有較高穩定性;直接化學發光免疫分析是采用化學發光劑直接標記抗原或抗體。常用的標記物有吖啶酯、異魯米諾等,該方法化學反應簡單、反應迅速;酶促化學發光免疫分析法,是以酶標記生物活性物質,在發生免疫反應時,酶作用于發光底物,使其在信號試劑下發光,從進行發光測定。常用的用于標記的酶有ALP、HRP等。
表1 化學發光免疫分析的分類
(資料來源:中國知網)
與其他方法相比,化學發光免疫分析法靈敏度高、簡單穩定、無污染無毒無害
化學發光免疫分析方法是放射免疫分析(RIA)和酶聯免疫分析方法(EIA)的升級,兼具無放射性和致畸物質,并且對環境無污染、對身體無危害等優點。在技術上,具有以下優點:
靈敏度高,使化學發光免疫分析具有優越性,相比放射免疫分析(RIA)10-12mol/L的靈敏度,其靈敏度可高達10-22mol/L。化學發光免疫分析能夠出RIA和EIA無法檢出的物質,對疾病的早期診斷意義重大。線性動力學范圍廣,化學發光免疫分析方法放光強度范圍優勢明顯,與其他方法相比吸收度范圍高出2-4個量級。此外,RIA也有較寬的線性動力學范圍,但其放射性限制了其應用。光信號持續時間長,化學發光免疫分析方法產生的光信號持續時間較長,實驗操作較為簡單。分析方法簡便快捷,化學發光免疫分析方法測定時,一般僅需一種試劑或復合試劑的一步模式。結果穩定、誤差小,該方法無需任何其他光源照射,樣品自身可以發光,可以有效避免光散射等分析帶來的影響,促使分析結果靈敏可靠。安全性能好,使用時間長,該方法測定過程中未使用放射性物質,截至目前,仍未發現其對環境及身體的危害性,試劑較為穩定,保存期可以長達半年或一年。
表2 化學發光免疫分析法與其他同類免疫分析產品的異同
(數據來源:中國知網)
化學發光免疫分析法在激素、蛋白質、腫瘤、病毒、毒物等檢測中均有應用
化學發光免疫分析逐漸成為生物技術領域一種重要的檢測方法,在激素、蛋白質、腫瘤、病毒、毒物等中均有應用。其中,尤其是對于甲狀腺激素、生殖激素、腎上腺激素、垂體激素等激素,可以根據診斷情況以及診斷后恢復情況等數據來提供,有效的改善了測量的靈敏度。對于蛋白質、腫瘤等的檢測,該系統內可以使反應物產生均相混懸液,增大反應面積,從而加速免疫反應,快速分離,自動洗滌,避免了許多影響因素,可以廣泛使用。對于病毒以及毒性物質的檢測,諸多臨床實驗表明,化學發光免疫分析法受體內血脂等影響較小,靈敏度更高,有效的降低了人為誤差,提供了更加精準的數據。
結語
化學發光免疫分析法主流的分析方法有直接化學發光免疫分析、電化學發光免疫分析及酶促化學發光免疫分析法。其中,直接化學發光免疫分析法具有靈敏度高、線性動力學范圍廣、光信號持續時間長、分析方法簡便快捷、結果穩定、誤差小、安全性能好,使用時間長等優點,并且在臨床激素、蛋白質、腫瘤、病毒、毒物等檢測中應用較為廣泛。
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